HLA分型技术(二) - HLA基因检测新闻
(二)PCR/SSO技术
此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecific oligonucleotide)探针又能探测出等位基因间1~2个核苷酸的差异,故PCR/SSO技术具有灵敏度、特异性强、需样本量少等优点。
(三)PCR/SSP技术
目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异性引物(sequence specific primer,SSP),借助PCR技术获得HLA型别特异的扩增产物,可通过电泳直接分析带型决定HLA型别,从而大大简化了实验步骤。
由于传统方法在Ⅱ类抗原分型方面困难较大,故上述几种基因分析型方法目前主要用于Ⅱ类基因座。此外,目前已建立的HLA基因分型技术还包括PCR单链构像多态性分析(PCR-single strand conformational polymorphism,PCR-SSCP)和PCR 异源二聚体电泳多态即PCR指纹图(PCr fingerprinting)分析。DNA分型技术的应用,使HLA型别分析达到了更精细的水平,并因此发现了更多的HLA多态性。HLA的DNA分型技术现已成为血清学方法的竞争者,并可能在不久的将来完全取而代之。
HLA是目前所知人体最复杂的遗传多态性系统。HLA研究涉及免疫学、生物学、遗传学、分子生物学、医学等多个学科,并已发展成为一个独立的学科分支。迄今HLA研究已达到相当深入的水平,并在诸多方面取得显著进展,包括HLA复合体结构;HLA分子结构及其表达的调控;HLA分子功能,尤其是在抗原处理、呈递及T细胞识别中的作用;HLA的DNA分型及多态性研究;HLA与疾病的关系;HLA与移植的关系等。HLA研究不仅使器官移植成为一种极有价值的治疗手段,并给基础与临床免疫带来了突破性进展。已经证实,HLA复合体中存在控制免疫应答的基因以及HLA参与约束免疫细胞间相互作用,这表示HLA涉及生命活动的各个水平与多个方面。可以预期,对HLA的研究将继续成为免疫遗传学最活跃的部分;对HLA的应用将扩展到基础、临床、预防医学的各个领域。
声明:转载此文是出于传递更多信息之目的。若有来源标注错误或侵犯了您的合法权益,请作者持权属证明与本网联系,我们将及时更正、删除,谢谢。 邮箱地址:2513零1765#qq.com
==========================================================
您可能喜欢的内容
==========================================================
MHC)的表达产物
HLA-B27检测方法及意义HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibity Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。根据HLA抗原结构,功能与组织分布的不同,可分为三类:Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原,广泛分布于各组织有核细胞表面,包括血小板和网织红细胞,成熟的红细胞一般不含HLA抗原;Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、DQ系列抗原,主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达,这两类抗原都与移植有关,其中Ⅱ类抗原更为重要;Ⅲ类分子为补体成分。图片近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明,某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关,这些病人大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病,因此,分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发 ...
HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibity Complex
HLA-B27检测方法及意义HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibity Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。根据HLA抗原结构,功能与组织分布的不同,可分为三类:Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原,广泛分布于各组织有核细胞表面,包括血小板和网织红细胞,成熟的红细胞一般不含HLA抗原;Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、DQ系列抗原,主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达,这两类抗原都与移植有关,其中Ⅱ类抗原更为重要;Ⅲ类分子为补体成分。图片近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明,某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关,这些病人大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病,因此,分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发 ...
HLA抗原的检测方法介绍 HLA-A、B、C抗原的检测
(一)HLA-A、B、C抗原的检测HLA-A、B、C抗原可用血清学方法鉴定,故又称SD抗原(serologically defined antigen),常采用微量淋巴细胞毒性试验(microlymphocytotoxicity test),又称补体依赖细胞毒试验(complement dependent cytotoxicity,CDC)。基本步骤是分离纯化外周血中的淋巴细胞,加一组已知HLA抗血清,20℃60分钏后,再加家兔补体,37℃ 60分钏后加台盼兰染色观察结果,如淋巴细胞染成兰色则为阳性,表明待检淋巴细胞表面具有与已知抗血清相应的抗原。也可用51Cr标记的细胞毒试验。(二)HLA-DR、DQ抗原的检测HLA-DR、DQ抗原检测的基本方法是采用微量淋巴细胞毒性试验。先从待检者外周血中分离纯B细胞,阳性血清可来自经产妇,但需用血小板 ...
【诊疗·检查流程】HLA实验检测中心检查指南
HLA抗原 HLA(human leukocyte antigen)是人类白细胞抗原,存在于人体的各种有核细胞表面,是每个人不可混淆的“特征”,是机体免疫系统识别“自我”和“异己”的基础,在同种异体组织器官移植以及移植物排斥反应中起最重要作用。 根据不同的基因位点,HLA抗原常分为三大类型:I类、II类及III类抗原。I类抗原:HLA-A、B、C位点II类抗原:HLA-DR、DP、DQ位点III类抗原:补体等HLA检测分辨率:低分辨率 A*02高分辨率 A*0201HLA抗体 群体反应性抗体(Panel reactive antibody,PRA)---移植受者体内所含有的抗HLA抗体的水平。 HLA抗体是由于HLA不相合,而在免疫反应中产生的针对HLA特定位点的抗体,妊娠、输血或器官移植等可产生HLA抗体。03适用范围图片 ...
HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因,表达在机体中所有有核的细胞上,尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量
HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因,表达在机体中所有有核的细胞上,尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量随着网络及媒体的发展,强直性脊柱炎(AS)也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星,到一些普通的患者,都在经历着病痛的折磨。HLA-B27(人类白细胞抗原B27),是强直性脊柱炎(AS)实验室检查的重要指标,在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天,我们从检验医学的角度谈一下,HLA-B27检测的方法学区别以及其临床意义。图片HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因,表达在机体中所有有核的细胞上,尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。我们根据HLA的特点,可以进行血清学、细胞学和分子生物学的分型。根据它的表达特点,用于临床上的检测HLA-B27的常见方法包括微量淋巴细胞毒法(complement dependent cytotoxity ...
HLA-b27阴性、阳性与AS的关系 - HLA基因检测新闻
HLA-b27“阴性”“阳性”与AS的关系 据多项研究调查结果显示,强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率高达90%,而普通人群中HLA-B27阳性率仅为4%-9%;HLA-B27阳性者强直性脊柱炎发病率为10%-20%,而普通人群发病率为千分之一到千分之二,相差约100倍。根据国内已有的调查显示,强直性脊柱炎一级亲属的患病率为24.2%,比正常人高出120倍。而HLA-B27阴性的强直性脊柱炎患者亲属的发病率远低于HLA-B27阳性患者的亲属。所有这些都说明,HLA-B27在强直性脊柱炎发病中起到了重要作用。尽管HLA-B27与强直性脊柱炎有很强的关系,但不可过度解读HLA-B27在强直性脊柱炎诊断中的价值和意义,也就是说查出HLA-B27阳性并不能直接确诊为强直性脊柱炎。强直发病年纪与HLA—B27“阴性、阳性”有 ...
马上开始检测,获得精准资料
免费获取方案 →
一站式基因检测服务专家
专注于精准基因检测服务